Деревянные кубики-колодки для наклеивания пропитанного целоидином материала. Готовят, как правило, из березы или бука. Колодки подвергают предварительной обработке с целью извлечения дубильных и красящих веществ для обеспечения длительного хранения блоков с наклеенным материалом в растворе спирта объемной долей 70%. Для этого колодки сначала в течение нескольких часов вываривают в растворе соды массовой долей 2%, затем в течение нескольких недель или месяцев выдерживают в растворе этанола (70-96 об.%), Периодически меняя его до тех пор, пока он не перестанет окрашиваться, и сушат в термостате.
Гематоксилин Эрлих. 20 см3 раствора гематоксилином массовой долей 10% в растворе этанола объемной долей 96%, (SO см3 раствора этанола объемной долей 96%, 100 см3 глицерина, 100 см3 дистиллированной воды, 3 см3 ледяной уксусной кислоты, 3 м алюмокалиевих квасцов, помещают в банку с широким горлом вместимостью не менее 500 см3, завязывают марлей и оставляют па света для созревания в течение недели.
Раствор эозина (мас 0,25-0,5%). Сухой эозин растворяют в воде или растворе этанола объемной долей от 40 до 70%.
К а р б о л — к с и л о л. В теплой сосуде смешивают 1 часть кристаллической карболовой кислоты (температура плавления 42 ° С) с 4-5 частями ксилола (или скипидара).
Смесь Ван Гизону. Смесь гематоксилином Вейгарта с пикрофуксином.
Гематоксилин Вейгарта: смеси Вейгарта I и Вейгарта II.
Вейгарт I: раствор гематоксилином массовой долей 1% в растворе этанола (96 об.%).
Вейгарт II: 4 см3 раствора FeCl3 • 6Н2Про массовую долю 50%, 1 см3 концентрированной соляной кислоты плотностью 1,15 — 1,19 г/см3 и 9 см3 дистиллированной воды.
Судан III (IV). К 0,5 м сухого Судана добавляют 100 см3 смеси, состоящей из раствора этанола (70 об.%) И ацетона в соотношении 1:1, настаивают несколько дней при комнатной температуре, изредка взбалтывая, фильтруют и хранят в стеклянной таре.
Збезводнювальна жидкость. Может иметь один из соединений, рекомендуемых (см3): 1) раствор этанола (96про.%) — 50; ацетон — 30; хлороформ — 10; эфир -5; ледяная уксусная кислота — 5, 2) этанол абсолютный — 60; ацетон — 20; хлороформ — 10; эфир — 10.
Методические указания. Метод разработан Всероссийским научно-исследовательским институтом мясной промышленности и рекомендован как ускоренный при анализе мяса в сочетании с органолептическими показателями позволяет в течение 40-60 мин получить полное представление о состоянии, степень свежести и созревания мяса. В это время внедрено ГОСТ 50372-92 «Мясо. Метод гистологического исследования ». Он позволяет раньше, чем физико-химические и биохимические методы, судить об изменениях, происходящих в тканях мяса в процессе прижизненных изменений, технологической обработки и хранения. Результаты гистологического анализа отличаются высокой вероятностью и в ряде случаев могут быть дополнены данными физико-химических, биохимических, органолептических, микробиологических или других исследований.
Процесс гистологического исследования включает в себя следующие основные этапы: фиксацию образцов, подготовку проб к изготовлению срезов тканей, изготовление срезов (микротомирування) окраску и помещения срезов под покровное стекло; микроскопию готовых препаратов и обработку результатов исследования
.Фиксация — обработка материала с целью сохранения тканевой структуры такой, какой она была во время отбора образца, и предотвращение ее дальнейших изменений. Чаще всего для этой цели используют формалин (раствор формальдегида массовой долей 40%).
При фиксации материал промывают проточной водой. Это необходимо для удаления формалина перед дальнейшей обработкой,, что обеспечивает равномерность дальнейшего окрашивания срезов.
Микротомирування необходимо для придания рассматриваемом материала однородности и скрепления тканей. Обычно для этого используют замораживания (уплотнительное среда — замерзающая вода) или целоидин. Заключение материала в целоидин дает возможность получать более тонкие срезы, а также исследовать рыхлые, распадающиеся ткани.
Заключение срезов под покровное стекло предполагает предварительное окрашивание с целью оптического дифференцировки структурных элементов клеток и тканей. Для этого применяют различные красители, контрастные по цвету и избирательные до различных тканевых структур. Различают два подхода к покраске — прогрессивный (срезы обрабатывают красителем до момента их достаточного окраски) и регрессивный (срезы сначала перекрашивают, а затем избыток красителя удаляют). В практике чаще применяют регрессивный способ окрашивания. Окрашенные срезы исследуют под микроскопом.