Рис. 2.9. Кювету (7) и вкладыш (2) для измерения цветности жира

Порядок проведения анализа. При измерении цветности свиного жира подготовленную кювету с исследуемым образцом помещают в кассету для образцов, отражающих. Ручку «светофильтра» ставят перед цифры, соответствующей светофильтра с эффективной длиной волны 410 нм, и проводят определение так, как это указано для образцов, отражающих. После записи отсчета ручку переводят на цифру, которая соответствует светофильтра с эффективной длиной волны 510 нм, и аналогично снимают показания, устанавливая прибор на ноль по показателям градуировочнои пластины для светофильтра с длиной волны 510 нм, снова снимают и записывают данные шкал трех правых ручек прибора.

Результаты, характеризующие цветность свиного жира, записывают в виде двух чисел, одно из которых является результатом измерения отражательной способности образца со светофильтром с эффективной длиной волны 510 нм, остальное представляет собой отношение отражательной способности образца, измеренной со светофильтром ХЭф = 510нм, с отражательной способности образца, определенной То светофильтром Хэ. = 410 нм.

Поскольку в процессе хранения в холодильнике говяжий жир иногда приобретает зеленоватый окраски, дополнительно определяют интенсивность окраски как природного, так и жира, позеленел.

При определении интенсивности окраски говяжьего жира измерение проводят со светофильтром с эффективной длиной волны 460 и 475 Нм.

Кювета с плексигласа с образцом жира помещают в кассету для образцов, отражающих. Ручку «светофильтра» ставят перед цифры, соответствующей светофильтра с эффективной длиной полные 460 Нм, или против ручки соответствует светофильтра а. = 475 нм, и измеряют, как указано выше. Полученный на шкалах трех правых ручек отсчет характеризует интенсивность окраски образца.

Различные образцы говяжьего жира характеризуются примерно следующими величинами отражения (%): интенсивно-желтый — 38, желтый — 47, светло-желтый — 54.

Для определения наличия в образце зеленоватого оттенка измерения проводят с двумя светофильтрами: с Хэф = 460нм и X., = 440 нм или ЗФ = 475 нм и Х ^ = 440 нм. Метод определения такой же, как для свиного жира.

Полученные результаты выражают отношением показаний, полученных со светофильтрами 460/440 или со светофильтрами 475/440. В первом случае образцы жира с зеленоватым оттенком характеризуются отношением> 1, а желтые <1, во втором случае — зеленоватые образцы> 1,10, желтые <1,10.

В табл. 2.4 приведены возможные показания при определении зеленоватого оттенка в ряде образцов говяжьего жира.

После снятия спектральных кривых и расчетов делают выводы и формулируют вывод, сопоставляя данные с результатами визуальной оценки анализируемых жиров.

Лабораторная работа № 5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ микроструктурных ПОКАЗАТЕЛЕЙ МЯСА

Цель работы. Приобрести практические навыки определения микроструктуры мяса на основе оптических методов.

Задачи. Подготовка ультратонких срезов мяса и прямое микроскопированием входящих в него тканей.

Объекты исследования. Образцы мышечной ткани различных видов убойных животных и птицы с фиксированным сроком хранения (рекомендуется режимы хранения — температура 4 0С, относительная влажность воздуха 80%).

Материалы, реактивы и оборудование. Нейтральный раствор формалина; спирт-ректификат объемной долей 50, 70, 96% и абсолютный (безводный) этанол, смесь этанол — эфир (1:1); растворы целоидину массовой долей 2, 6, 12%, приготовленные на смеси спирта с эфиром; збезводнювальна жидкость; хлороформ; пихтового бальзам; гематоксилин Эрлих; водный (или спиртовой) раствор соляной кислоты массовой долей 1%, раствор нашатырного спирта объемной долей 20-25%; водный раствор эозина массовой долей 1%; карбол-ксилол; смесь Ван Гизона; судан III или IV; колбы или широкогорлые пробирки; банки с широким горлом и притертыми пробками; деревянные кубики-колодки для наклеивания пропитанного целоидином материала; микротом; микроскоп; фильтровальная бумага; предметное стекло; яичный белок с глицерином; препаровальные игла; покровное стекло.

Приготовление реактивов. Нейтральный раствор формалина. Для нейтрализации формалин наливают в стеклянную банку с притертой крышкой, на дно банки насыпают порошкообразную мел или магнезию (100 г на 1 дм3 формалина). Содержимое сосуда несколько раз взбалтывают. Через сутки формалин приобретает нейтральную реакцию. На практике выходной нейтральный раствор формалина принимают за 100%-ный и из него непосредственно перед фиксацией готовят необходимые рабочие растворы массовой долей 10 и 20% соответственно к описанию метода. Как растворитель при этом используют водопроводную воду.

Растворы этанола (50 и 70про.%). Чтобы получить раствор этанола с необходимой объемной долей спирта, выходнойСпирт-ректификат (96об.%) разбавляют дистиллированной водой до объема 100 см3. Необходимый для разведения объем исходного спирта определяют по формуле

А-100

X =

Fl-100

-'(2.43)

Где а — необходима объемная доля спирта; b — исходная объемная доля спирта.

Абсолютный спирт (безводный). Готовят из этанола объемной долей 96% путем извлечения из него воды с помощью обезвоженной сульфата меди (выход абсолютного спирта составляет 70%). Для обезвоживания кристаллический сульфат меди прокаливают в фарфоровой чашке, постоянно помешивая, до приобретения им белого цвета (можно пользоваться готовым безводным сульфатом меди). Прокаленный остывший сульфат меди засыпают в банку с широким горлом с раствором этанола (96 об.%) Небольшими порциями (5% к объему этанола), а затем подсыпают его в небольшом количестве ежедневно в течение 3-4суг тех пор, пока сульфат меди перестанет менять цвета (останется белым). Приготовленный этанол хранят на осадке сульфата меди. Контроль проводят по признакам: порошок сульфата меди в абсолютном спирте не синеет, а при добавлении ксилола спирт остается прозрачным.

Растворы целоидину массовой долей 4-6 и 8-12%. Готовят из смеси абсолютного этанола и чистого (медицинского) эфира в соотношении 1:1. Используют отмытую от эмульсии кино — или рентгеновскую пленку на нитроцеллулоидний основе, почти не оставляет зольных остатков, после смывания с ее эмульсия прозрачная, имеет слегка желтоватый цвет и хорошо горит.

Для заливки материала в целоидин в лаборатории необходимо иметь набор одинаковых банок с широким горлом и притертыми пробками. Из них составляют рабочую батарею с растворами этанола объемными долями 50, 70, 96 и 100%, со смесью спирта с эфиром, растворами целоидину I (массовая доля 4-6%) и II (массовая доля 8-12%).